实验室肝素和低分子肝素含量的测定解决方案

肝素是高度硫酸化的糖胺聚糖，一种的由葡萄糖胺，L-艾杜糖醛苷、N-乙酰葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸交替组成的粘多糖硫酸酯，含10-30个二糖单位不等。自从在临床上用作抗凝剂以来，肝素一直是一种主要的抗凝药物。其纯度和安全性直接关系到患者的生命健康。例如，在人凝血因子Ⅷ中，肝素残留可能干扰凝血过程，因此需要通过检测方法来评估其含量。

对肝素的检测，不仅是药品质量控制的核心环节，更是一项涉及复杂化学分析、严格法规标准的系统性工作。目前实验室检测肝素含量仍是较为复杂的问题。现有的肝素检测方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、酶联免疫吸附法、凝胶过滤层析法等，这些方法较成熟且具有较好敏感性，但是普遍存在操作复杂、耗时长、特异性差及定量准确性低等问题。

微源检测技术团队针对某药企情况按需开发了某生物制品中低分子肝素和硫酸肝素含量分析方法。采用LC-HRMS，对UA-GlcNAc (IVA)、$UA2S GlcNAc (IIIA)、$UA-GlcNAc6S (IIA)、$UA-GlcNS (IVS)、$UA2S GlcNAC6S (IA)、$UA2S-GlcNS (IIIS)、$UA-GlcNS6S (IIS)、$UA2S GlcNS6S (IS) 和 $UA2S-GlcNCOEt6S (I-P)进行了定量分析。

选用2mM乙酸钙（含0.01单位肝素裂解酶）对肝素及样品在20mM乙酸铵溶液中进行消化，37℃孵育过夜，并用甲醇进行淬灭。方法重现性高，灵敏度高。图为八种肝素分子前体离子。

肝素含量残留检测确能够保药物或生物制品中肝素的含量符合安全标准，避免因肝素残留导致的不良反应或影响药物的疗效。目前暂无明确的国家标准或行业标准直接针对“肝素残留检测”的通用标准，现行药典要求二糖组成分析、分子量测定、核磁共振鉴别以及关键的生物效价测定，对相关杂质和污染物控制也日益严格。

应对多糖质量研究结构复杂性等核心难点，应开发高灵敏度、高特异性的检测方法。微源检测实验室专注杂质研究，实验室累计投入价值上千万，团队积累了丰富的药物质量研究经验，同步企业研发思路，充分发挥跨学科深度融合的技术优势，为药物研发企业提供安全准确可追溯的检测数据和结果，协助客户规划整体项目，把控关键项目节点，定期更新进展。

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