细胞培养过程中的牛血清白蛋白等杂质残留检测

细胞培养中经常会使用到胎牛血清（FBS），牛血清白蛋白（BSA，BovineSerumAlbumin）是一种主要存在于牛血清中的蛋白质成分，分子量约66kd，是一个单链蛋白，具有多种二级和三级结构，在水中具有高溶解性，能够与小分子（如脂肪酸、激素和药物）结合。后续通过洗涤、纯化等工艺可去除大部分BSA，但微量BSA依然会存在于生物制剂成品中。作为一种异源蛋白的代表，超过一定浓度的BSA能够引起机体的多种免疫反应，引起严重的副作用，从而影响生物制品的安全性。

如何对其安全性和质量进行控制，可参考药典规定疫苗成品中BSA残留量应不高于50ng/mL或50ng/剂。酶联免疫吸附法（ELISA）是常用的BSA残留检测方法。酶联免疫吸附测定法是将抗原或抗体结合在固相载体表面，利用抗原抗体的特异性结合以及抗体或者抗原上标记的酶催化特定底物发生显色反应，实现目标物检测的免疫分析方法，具有操作简便、快速、高灵敏度（可达ng/mL级）、高通量和低成本等优点，适用于多种样本类型。

而微源检测实验室技术团队针对这类生物药工艺残留也有过专题性的研究，图为牛血清白蛋白（BSA）等三种蛋白的残留量谱图，通过利用质谱分析（LC-MS/MS）以胰蛋白酶（Trypsin）为蛋白水解酶，通过还原酶解后，进样LCMS系统检测。该方法更适用生物制药的研究场景，通过验证，能够确保检测的准确性和重复性。

牛血清白蛋白除在细胞培养中提供必需的氨基酸和营养物质外，还可用作稳定剂，防止目标蛋白质的聚集和变性，也可以在ELISA和其他生物分析中作为标准品使用，或是作为抗原或抗体的稀释缓冲液成分等生。如在生产环节中有添加使用，也需对其中BSA进行检测。微源检测实验室专注药物杂质研究，提供生物药工艺残留、酶蛋白残留等技术服务，能够根据不同样品情况灵活选择分析方法，提供生物制品各类工艺杂质的检测方法开发及验证，助力生物制药企业在激烈竞争中确保产品质量、赢得市场信任，已帮助百余家药企完成质量申报。如有相关检测需求欢迎咨询！