高效液相色谱检测检测顺丁烯二酸及方法学验证

高效液相色谱检测检测顺丁烯二酸及方法学验证

顺丁烯二酸，也叫马来酸、失水苹果酸，化学式C4H4O4，分子量116.0722，CAS登录号110-16-7，可用于制造不饱和聚酯树脂和生产酒石酸、富马酸、琥珀酸、DL-苹果酸、染色助剂和油脂防腐剂等化合物，在医药、农药、食品等方面有着比较广泛的应用。可以提高药物的溶解性、稳定性和生物利用度，检测和控制顺丁烯二酸组分的含量，对保证其医药方面的质量安全具有积极的影响。

顺丁烯二酸的含量测定可以取本品约1.0g，精密称定，加水100ml使溶解，加酚酞指示液数滴，用氢氧化钠滴定液（1mol/L）滴定。每1ml氢氧化钠滴定液（1mol/L）相当于58.04mg的C4H4O4。实验室常用顺丁烯二酸含量测定方法是利用高效液相色谱法。微源检测实验室查阅文献资料分享一则利用高效液相色谱检测顺丁烯二酸，分离熔点更高的富马酸并进行方法学验证的方法。

色谱条件以0.1%磷酸水溶液∶甲醇=88∶12（V∶V）为流动相，流速0.5mL·min-1，检测器分析波长210nm，进样量10μL。将配制的顺丁烯二酸、富马酸系列标准溶液，用0.45μm微孔滤膜过滤后，在色谱条件下进样、得到各标准溶液的谱图。以有机酸标准溶液的质量浓度x对峰面积y进行线性回归，得到标准曲线方程。

取有机酸混合标准溶液，以空白为基质进行加标回收实验，进样，计算相对标准偏差（RSD）和平均加标回收率，结果显示各有机酸的平均加标回收率在99%~105%之间，RSD均在0.5%以下，说明方法的精密度高。移取1mL液体样品，用水稀释后定容至100mL容量瓶，摇匀，用0.45μm滤膜过滤后进样10μL测定。

检测方法中富马酸峰与顺丁烯二酸峰的分离度大于2.5，供试品溶液色谱图中如有与富马酸峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，含富马酸不得过0.5%，其他单个杂质按对照品溶液中顺丁烯二酸峰面积计算不得过0.1%，杂质总量不得过1.0%。

高效液相色谱法具有高柱效、高选择性、分析速度快、灵敏度高、重复性好、应用范围广等优点。已成为现代分析技术的重要手段之一。利用高效液相色谱法测定顺丁烯二酸等有机酸含量的方法，简单快速，结果准确。微源检测实验室拥有GC-MS、LC-MS、HPLC等多类专业检测设备仪器，对有机酸的检出限，精密度等方面多数能够达到并高于现行标准，实验室遵照ISO17025和GMP等高标准进行管理，为生物医药领域伙伴产品生产过程中可能产生的杂质提供评估报告、方法开发、验证及样品检测等一系列完整的解决方案。更多检测问题欢迎私信及评论区留言！