辅料检测-技术分享实验室高效液相色谱检测发酵液中的甘油残留

技术分享：实验室高效液相色谱检测发酵液中的甘油残留

1,2,3-丙三醇，即日常用的甘油，化学式C3H8O3，是一种无色、澄清的黏稠液体。能从空气中吸收潮气，也能吸收硫化氢、氰化氢和二氧化硫，够与水或乙醇能任意混溶，在丙酮中微溶，在三氯甲烷中不溶，难溶于苯、氯仿、四氯化碳、二硫化碳、石油醚和油类，是甘油三酯分子的骨架成分。

在工业上，甘油被用作化学原料或中间产物，制造合成树脂、塑料、油漆、硝酸甘油、油脂和蜂蜡等；在生活中，甘油被用于化妆品等产品的锁水、保湿；在医学上，甘油是重要的药用辅料，被用作制剂中的润滑剂、湿润剂、注射剂或胃肠道用药的溶剂。甘油的用途广泛，因此测定其含量也就具有非常重要的意义。

根据文献资料，甘油含量的测定方法较多，包括高碘酸氧化法、Cu2+络合比色法、紫外可见-分光光度法、高效液相色谱、气相色谱、近红外光谱法以及原子吸收法等。高碘酸氧化法也是一种较为常用的甘油检测方法，而红外光谱是根据被测样品的红外光谱特征得到其成分及含量的方法，微源检测实验室查阅资料分享一种利用高效液相色谱检测发酵液中甘油含量的方法。

在发酵行业中，甘油常作为底物，是发酵液中生物合成的直接前体，所以残留量对发酵效率较为重要，分享方法中即用甘油作为底物检测发酵过程中发酵产物中底物甘油浓度。分析条件柱温30℃；流动相：乙腈-水（85∶15，V/V）；流速：1.0mL/min，用示差折光检测器检测。

精确吸取1.0000g甘油，重蒸水稀释定容于制成100.0mg/mL甘油溶液，再次精确吸取1.00mL重蒸水稀释定容配制成10.0mg/mL甘油标准储备液。分别精确吸取标准储备液0.10mL，0.20mL，0.40mL，0.60mL，0.80mL和1.00mL置于10.00mL的容量瓶中，用流动相稀释定容至刻度。将发酵液离心处理流动相稀释定容至10mL容量瓶中用0.22μM的滤膜过滤。不同浓度的甘油标准溶液分别进样20μL。

每份标准溶液进样3次，计算峰面积的平均值计算线性范围，并进样测定发酵液中底物甘油残留，以甘油标准溶液浓度为横坐标（x），峰面积平均值为纵坐标（y），所得甘油标准溶液相关系数大于0.998，检测结果符合发酵工程控制和产品质量检测的要求。利用高效液相色谱检测甘油含量，方法的过程操作简便，分离度和检测灵敏度高。

实验室还可对甘油项目进行包括成分检测、含量检测、纯度检测、杂质检测、密度检测、浓度检测、纯度检测、液相检测、气相检测等。微源检测拥有气相色谱仪、液相色谱仪、液质三重四级杆、气质质、液质质、扫描电镜、核磁、二次离子质谱SIMS等检测专业多类检测仪器，遵照ISO17025和GMP等高标准进行管理，为生物医药领域及其他行业伙伴产品生产过程中可能产生的杂质提供评估报告、方法开发、验证及样品检测等一系列完整的解决方案。更多检测问题欢迎私信及评论区留言！