实验室对蛋白样品中二硫苏糖醇DTT残留含量的色谱检测方法

实验室对蛋白样品中二硫苏糖醇DTT残留含量的色谱检测方法

关键词：糖醇检测

二硫苏糖醇（简称为DTT），外观为白色粉末，是一种小分子有机还原剂，其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环（含二硫键）的构象稳定性，被广泛应用于细胞生物学、生物化学和生物医学应用领域，可作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂，蛋白质中双硫键的还原等，有着较为广泛的应用。

但是需要注意二硫苏糖醇（DTT）还原性较强，在临床和实验领域可能会破坏蛋白质结构从而引起酶失活现象，造成生物分子的氧化损伤因此有必要对要药品中的二硫苏糖醇（DTT）含量进行检测。考虑到二硫苏糖醇（DTT）容易被氧化，响应不稳定等性质，实验室需开发一种满足要求的检测方法。

查阅文献资料分享一种利用超高效液相色谱UPLC检测二硫苏糖醇（DTT）含量的办法。配制DTT标准品水溶液；样品滤液；超纯水作为空白溶液；DTT标准品、样品滤液和超纯水中加入过量的Cu(NO3)2混匀后获得混合物进行UPLC分析，获得DTT峰；将标准品水溶液获得的DTT峰面积相对DTT浓度绘制标准曲线，利用外标法根据测得的DTT峰面积对样品中残留的DTT进行浓度定量。

超高效液相色谱是一种基于小颗粒填料的液相色谱系统，支持更高的压力，更准确的流路体积控制，更好的线性，更高的灵敏度。在分离能力，灵敏度和专属性等方面有着巨大优势，近年在药物分析研究领域中得到了越来越多的应用。

如果是蛋白中二硫苏糖醇的残留检测，还可以通过液质联用的方法，利用强大的定性定量能力对实现精准程度更高的检测，微源检测实验室，可根据不同检测需求目的提供相应检测方案，实验室按照GMP要求进行相关管理，拥有光谱质谱色谱波谱等百余台精密检测设备，可对不同样品中的二硫苏糖醇（DTT）含量进行测定。

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