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培养基成分及微量元素分析检测
培养基成分及微量元素分析检测
细胞培养基是生物工艺中的关键原材料,培养基成分有很多,为减少实验次数会采用一些实验设计。通常细胞培养基成分可以概括为:碳源、氮源、氨基酸、维生素、脂肪酸、pH缓冲剂、微量元素等,通过对各种成分及逆行合理的组合是培养基优化的关键。文章主要集中在培养基中各种微量元素的讨论。
培养基中的微量元素有效浓度非常低,有时甚至低于标准分析仪器的检测阙值但这些微量元素在上游工艺中促进或抑制细胞生长以及蛋白质表达或质量达到不同水平,在调整代谢通路,酶和信号分子活性上起着非常关键的作用。例如:
ž 铜:缺乏导致乳酸脱氢酶和线粒体氧化酶的下调;高浓度的铜能转换乳酸代谢;从净乳酸产生到净乳酸消耗,提高细胞密度和表达量,以及C端赖氨酸清除,降低互补决定区色氨酸铁:影响抗体的糖基化异质性
ž 锌:提高抗体生产率,降低细胞凋亡
ž 锰:增加位点空间,增加高甘露糖,降低man5,提高半乳糖基化,降低睡液酸化,降低互补决定区色氨酸氧化
ž 钼:增加生理活性物质的产生
ž 硒:保护细胞免受氧化应激和自由基的侵害,促进铁转运
ž 钒:模拟胰岛素和胰岛素类似物的代谢功能,促进细胞生长
ž 钴:增加抗体的N端半乳糖基化和末端的糖基化,提高抗体表达单位生产率
实验室利用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)对各种原料中的杂质元素和组分元素进行了分析,检测元素:钠(Na)、镁(Mg)、铝(Al)、钾(K)、钙(Ca)、钛(Ti)、钒(V)、铬(Cr)、锰(Mn)、铁(Fe)、钴(Co)、镍(Ni)、铜(Cu)、锌(Zn)、砷(As)、硒(Se)、锶(Sr)、钼(Mo)、镉(Cd)、锡(Sn)、锑(Sb)、钡(Ba)等元素,并提供平均值和标准偏差浓度结果。
培养基对生物医药行业的发展起着至关重要的作用,对细胞的状态,高密度的维持以及产量都发挥着重要的作用,是目前研究和应用的热点。 微源检测实验室利用采用离子色谱(IC)、电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)多种测试方法可对培养基中盐类和微量成分进行定量分析,对培养基中的其他成分组成含量比例进行分析,助力企业优化细胞培养工艺和培养基组成。如您有相关业务需求,欢迎致电咨询!
*部分图文整合自网络,如有侵权请联系删除。