蛋白质等样品的分子量测试方法

蛋白质等样品的分子量测试方法

分子量是有机化合物基本的理化性质参数，是化合物化学式中各个原子的相对原子质量之和，准确的分子量数据可以验证有机化合物及生物大分子的结构是否正确。尤其在蛋白质研究发展过程中作为主要特征参数，准确的分子量测定是科研生产活动的重要前提。常见的分子量测定方法包括静态光散射法、凝胶渗透色谱法（GPC）、生物质谱技术等。

凝胶渗透色谱法（GPC）也叫体积排除色谱法，是实验室应用较多的分子量检测方法，可检测范围大，操作简单，提供平均分子量值，以及聚合物样品中分子量分布的信息。与其他检测器（例如光散射或粘度检测器）结合，能够提供溶液中分子结构和大小的信息，在应用实例中，方法重复性好，准确度高。但在处理具有超高分子量或溶解性较差的线性聚电解质时传统的GPC法难以准确测量。

精确分子量还可以采用质谱法测定。质谱分子量分析结合肽谱图可以帮助确定氨基酸序列的正确性，或将物质分开分别测得绝对分子量，需要的样品量较少，可以检测蛋白质生物多肽等，分析较为复杂的混合样品。

另外还可以通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱测试，MALDI-MS是目前测定蛋白质分子量最先进的方法，对样品纯度要求低，能够测定纯度不高的混合物，降低对样品预处理的要求，是未来蛋白质等生物大分子分子量测定的主流工具。但是质谱图的解析和数据库的更新也是技术发展中需要解决的问题。

分子量是多糖、多肽、蛋白质等检测分析中首要的参数，是评估多肽药物的纯度、识别氨基酸序列和检测化学修饰（如磷酸化、糖基化等）是必不可少的一项质量检测指标，通过准确、快速、灵敏的分子质量测量，能够在生物医学研究、药物发现及开发等研究过程中都发挥重要作用。

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