实验室开发蛋白残留检测方法改进生产工艺

实验室开发蛋白残留检测方法改进生产工艺

蛋白质是由多种氨基酸分子缩合的肽链以一定方式形成的空间结构复杂的、分子量较大的生物大分子，参与机体免疫、营养代谢等各部分的生命活动。然而在进入机体后，易与特异性抗体结合引发过敏反应，例如注射用药物中的微量乳清蛋白就会引起严重的过敏反应。还可能与药物成分相互作用，影响药物的稳定性、效力和安全性。从药品质量方面考虑，从生产工艺源头除去这些大分子蛋白是解决问题的根本方法。

大分子蛋白具有高度的不均一性和不确定性，目前常规测定蛋白含量的方法有凯氏定氮法，考马斯亮蓝法，免疫共沉淀法等，但这些方法涉及通过沉淀分离目标蛋白，样品前处理繁琐，药物基质影响大，特异性差等过程问题。

微源检测实验室开发利用HPLC-SEC-FLD法，通过优选检测波长，减少了样品基质峰对分离度的影响。提高了灵敏度，成功检测到大分子蛋白残留，限度为10ppm，验证指标均符合可接受标准，适用于总蛋白残留量的测试，对样品进行简单处理即可进行分析，操作简便，重现性好。

HPLC（高效液相色谱）是一种实验室广泛用于蛋白纯度分析的技术，快速、准确地评估蛋白质样品的纯度和组成。SEC-HPLC（尺寸排阻高效液相色谱）是一种基于分子大小分离，通过利用具有不同孔径的固定相（填料）对样品中的蛋白质进行分离，实现蛋白质的分离和纯度分析。

药品生产过程中蛋白杂质的分离分析是一项复杂的工作，通常会通过加入絮凝剂、超滤、酶解等一系列不断改进的工艺技术，灵敏的残留蛋白的检测方法可以帮助去除这些大分子蛋白杂质，确保这些生产工艺的有效性和稳定性，其工艺进行验证和监测，严格控制以保证药品质量。

目前CFDA、EMA和FDA等均对这些大分子蛋白作出了一些控制要求，且EMA明确要求生产企业对于申请出口到欧洲市场的发酵类抗生素等产品时，需要在CEP文件中提供残留蛋白的检测结果。微源实验室专注药物杂质研究，开发残留总蛋白检测方法，监控生产纯化过程中蛋白的残留风险。

还可利用质谱等分析技术实现对杂质的高精度检测。检测前根据样品类型、所需灵敏度和特异性以及实验条件等因素选择合适的方法，包括方法开发、验证和样品检测的完整解决方案。如您有相关问题，欢迎咨询！ 

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