酶催化制备原料药产品中的酶残留检测

酶催化制备原料药产品中的酶残留检测

原料药的酶催化工艺路线中经过酶催化反应、过滤、结晶得到产品，但工艺中可能会有蛋白残留，在后处理过程中需要不断优化，CDE在对酶催化合成的原料药进行新药评审时，也会关注到催化反应的酶、淀粉、DNA等的残留，因此在生物制药等过程中需要对其中的各类残留杂质加以考虑。

以蛋白酶残留为例，酶作为催化剂可以显著提高反应效率和选择性，有时需要与其它酶或者辅酶用以共同作用。为了确保产品的安全性和质量，需要结合多种技术和方法来控制酶在产品或中间体中的残留量。各国药典中对蛋白含量有凯氏定氮法、福林酚法（Lowry法）、双缩脲法、BCA法和考马斯亮蓝法（Bradford法）等。

微源检测实验室通过实际案例检测化药中的蛋白残留含量，利用SEC-HPLC-FLD结合体积排阻色谱和荧光检测器，通过不同孔径的多孔凝胶实现不同体积分子的分离，荧光检测器FLD针对蛋白结构中特定的荧光基团，特征的激发波长和发射波长检测蛋白，开发了高灵敏性、高准确性的分析技术，相对于其他传统方法有更高的专属性和灵敏度。

方法可按杂质定量分析方法的要求，进行方法学验证，考察的参数包括专属性、线性/范围、准确度、精密度（重复性/中间精密度）、检测限和定量限、溶液稳定性，可以满足大部分的应用场景，适用于酶催化、或发酵制备的原料药，确保检测的准确性和可靠性。

随着生物制药领域的不断发展蛋白残留的检测与分析方法也在不断演进，类似液相色谱质谱联用（LC-MS/MS）、高分辨质谱（HRMS）和二维凝胶电泳联用质谱（2D-PAGE-MS）等，为杂质研究提供了更高的分辨率和灵敏度，以及更全面的蛋白质信息。具体可以结合多种技术手段，根据实际情况选择合适的方法，并进行方法验证和准确性评估。

酶催化已经成为有机合成和制药工业的重要手段，但催化过程后的杂质残留检测是一个复杂且重要的课题，微源检测专注药物杂质研究，考虑样品多个因素，结合特异性和灵敏度要求、分析成本和时间等选择分析方法，实现对杂质残留的定量测定，为纯化、工艺、制剂等过程中质量控制提供技术支持。如有相关检测需求，欢迎咨询！

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