抗体药中的蛋白A（proteinA）残留检测实验室方法分享

抗体药中的蛋白A（proteinA）残留检测实验室方法分享

Protein A蛋白A是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质，其含有E、D、A、B、C共5个同源性较高的抗体IgG结合结构域，以及1个胞膜结合结构域。通常在抗体纯化、免疫沉淀等生物技术中有广泛应用， 但在纯化过程中可能从色谱支持物上与抗体共洗脱，从固相中浸出，进入纯化终产品中导致污染。

这些微量Protein A残留对抗体药物的安全性（引起机体副反应）和有效性（影响药效和药代动力学）具有潜在的隐患，成为下游工艺源性杂质，影响产品的药理作用和生物学活性，引起不良反应。因此，Protein A的残留检测控制是抗体类药物杂质控制中的重要指标。2020版《中国药典》人用重组单克隆抗体制品总论、USP130等法规均对蛋白A的定量检测作出要求。

酶联免疫吸附测定（ELISA）技术是常用的Protein A残留高灵敏度方法，通过利用抗原抗体特异性结合的原理，通过捕获抗体和检测抗体的结合形成夹心复合物，再通过底物显色或荧光信号定量检测蛋白A的浓度。该方法可以准确测定抗体药物中Protein A的残留量，方法相对简单，精良度好，方便设定控制范围，能够在产品表征过程中快速的高灵敏的检测残留Protein A含量。

另外还可以通过实验室的液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）通过对抗体药物进行酶解，检测特征肽段的含量来间接测定Protein A的残留量，质谱法具有极高的灵敏度和准确性，能够检测到极低浓度的蛋白质，并提供精确的质量信息，适用复杂样品中含多种序列类似的蛋白含量检测。

色谱柱掉落的配基Protein A蛋白A、工艺中添加的酶等蛋白成分有诱发免疫原性的风险，是产品质量控制的重要指标，微源检测提供的纯化过程中的Protein A、蛋白酶等对工艺相关杂质残留检测，实验室专注杂质研究分析检测，帮助企业进行工艺优化、关键质量参数评价和产品放行，加速生物药创新开发。如有相关需求欢迎咨询！

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