宿主细胞蛋白HCP残留检测方法

宿主细胞蛋白HCP残留检测方法

宿主细胞是生产诸如重组蛋白、抗体药物或疫苗药物时最常使用的关键起始材料。而宿主细胞蛋白（hostcellprotein，HCP）即细菌细胞（如大肠杆菌）、酵母细胞（如酿酒酵母）和哺乳动物细胞（如中国仓鼠卵巢CHO细胞）等宿主细胞分泌的蛋白以及细胞凋亡、代谢产生的部分结构蛋白。

宿主细胞残留蛋白通常被视为关键质量属性，许多国家和地区的药品监管机构都要求生物药物在上市前必须进行HCP残留的检测，确保药物的安全性和有效性，避免导致患者的免疫反应等，制药企业应严格遵守相关法规要求，采用合适的检测方法和控制策略，确保HCP残留量在可接受范围内。

工艺残留蛋白质检测是生物制品质量控制的核心环节，实验室对宿主残留蛋白HCP残留检测方法，可分为毛细管电泳法、酶联免疫吸附法（ELISA）、质谱分析等技术方法。毛细管电泳法利用电场中蛋白迁移率差异实现分离检测。优势是能够快速、低样品消耗、适合电荷异质性分析，确定是灵敏度较低，多用于纯度分析而非痕量残留检测。

ELISA技术依赖于抗体识别对HCP蛋白进行定性与定量分析，是目前应用最广泛的技术。流程为：包被捕获抗体→封闭→加样→检测抗体→酶标二抗→底物显色→OD值测定。具有高灵敏度(ng/mL级)、高通量、操作标准化。但是应用ELISA技术对HCP蛋白进行准确的定性与定量分析的前提是有这些HCP蛋白的标准品以及对应的抗体。

LC-MS技术进行HCP蛋白的定性与定量能够避免EILSA方法中由于抗体缺失导致的定性与定量不准确。结合前端的液相分离手段，可以对复杂的多肽进行分离，进一步提高质谱的检测灵敏度以及动态范围。经高分辨质谱测定得到一级及二级质谱图，并进行序列库搜索匹配后，可得到HCP蛋白的种类列表，可在复杂场景中尝试采用，无需抗体具有高特异性。

微源检测专注杂质研究，可根据产品类型、工艺阶段和监管要求选择合适检测方法，建立残留分析方法开发和验证，帮助监测生产工艺确保生物制品的质量和安全，通过开发方法助力企业工艺优化、关键质量参数评价以及产品放行等工作，致力于为各药企，生物工程企业，科研院所等企业，提供高效准确的优质检测技术服务。若有相关需求，欢迎咨询。

*声明：本文有使用内容来源于网络和文献，如有侵权请联系删除。